蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強激發光

（一）載玻片

載玻片厚度應在0。8～1。2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發光在標本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發熒光。有時需用石英玻璃載玻片。

（二）蓋玻片

蓋玻片厚度在0。17mm左右，光潔。為了加強激發光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特製的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利透過，而反射激發光，這種反射的激發光女可激發標本。

（三）標本

組織切片或其他標本不能太厚，如太厚激發光大部分消耗在標本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發。另外，細胞重迭或雜質掩蓋，影響判斷。

（四）封裱劑

封裱劑常用甘油，必須無自發熒光，無色透明，熒光的亮度在pH8。5～9。5時較亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0。5mol/l pH9。0～9。5的碳酸鹽緩衝液的等量混合液作封裱劑。

（五）鏡油

一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標本時，必須使用鏡油，最好使用特製的無熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對影象質量略有影響。

1）嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作，不要隨意改變程式。

（2）應在暗室中進行檢查。進入暗室後，接上電源，點燃超高壓汞燈5～15min，待光源發出強光穩定後，眼睛完全適應暗室，再開始觀察標本。

（3）防止紫外線對眼睛的損害，在調整光源時應戴上防護眼鏡。

（4）檢查時間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發光強度逐漸下降，熒光減弱；標本受紫外線照射3～5min後，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過2～3h。

（5）熒光顯微鏡光源壽命有限，標本應集中檢查，以節省時間，保護光源。天熱時，應加電扇散熱降溫，新換燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅後欲再用時，須待燈泡充分冷卻後才能點燃。一天中應避免數次點燃光源。

（6）標本染色後立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑膠袋中4℃儲存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發。

（7）熒光亮度的判斷標準：一般分為四級，即“一”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮的熒光。“+++”—可見耀眼的熒光。