GUS染色及定量檢測

啟動子的表達模式及強度只能透過報告基因來檢測，目前在植物啟動子的研究中常用的報告基因有伊葡萄糖昔酸酶基因（GUS）、 綠色熒光蛋白基因（GFP）及其衍生岀來的其他熒光蛋白、熒光素酶基因（LUC）等。

背景說明

基因的表達調控是一個多階段、多層次的複雜過程，簡單的可以分為轉錄前、轉錄、轉錄後、翻譯、翻譯後這五個水平，其中轉錄水平上的調控是很關鍵的一環。啟動子是位於基因5‘端上游的DNA序列，能指導RNA聚合酶與DNA的正確結合、活化RNA聚合酶、募集相應的轉錄因子形成特異性轉錄起始複合體等，進而決定轉錄的方向和效率，是基因表達調控的重要順式元件，因此深入研究啟動子的結構、功能、作用模式等對於理解基因功能有重要的作用。

啟動子的表達模式及強度只能透過報告基因來檢測，目前在植物啟動子的研究中常用的報告基因有伊葡萄糖昔酸酶基因（

GUS

）、 綠色熒光蛋白基因（

GFP

）及其衍生岀來的其他熒光蛋白、熒光素酶基因（

LUC

）等。

實驗原理

1、

GUS染色

GUS

基因編碼β-葡萄糖醛酸乙醯轉移酶，屬水解酶類，在適宜的條件下，該酶可將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸酯（X-Gluc）水解生成藍色產物。

2、

GUS

報告基因的定量檢測

GUS

能與底物4-甲基傘型酮-β-葡萄糖醛酸苷（MUG，分子量352。3）反應產生熒光物質4-甲基傘型酮（MU，分子量198。2）。MU的激發波長為365nm，發射波長為456nm，其含量可由酶標儀測出。因此，我們可以根據單位質量的植物總蛋白在單位時間內產生的熒光物質的多少來定量的檢測GUS含量。

服務流程

客戶線上下單—訂單/實驗材料確認無誤—開展實驗—拍照/酶活檢測—出具實驗報告—專案結題

服務內容及說明

適用場景

1、 分析基因的啟動子表達的時空性和表達強度；

2、 透過組織化學染色來做啟動子活性的定性分析，還可以做啟動子活性的定量檢測；

3、 鑑定啟動子的順式作用元件。

注：如果樣本有其他特殊情況週期會延長（如基因表達量低導致染色情況不好，將以PCR實驗為準判定結果，並收取成本費）。

實驗交付內容

1、 GUS染色服務，提供手機拍照服務（專業拍照需要額外收費），可以返還染色後的葉片材料。

2、 GUS酶活性定量檢測，提供實驗報告。